TitinAb試劑盒使用前的樣本采集和處理至關(guān)重要

更新時(shí)間：2025-06-24

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　　TitinAb試劑盒在使用前，需將試劑盒內(nèi)所有試劑平衡至室溫，嚴(yán)格按照說明書規(guī)定的操作步驟和時(shí)間進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，避免試劑污染和交叉反應(yīng)。樣本的采集和處理也至關(guān)重要，應(yīng)遵循無菌操作原則，避免溶血、反復(fù)凍融等情況，以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

　　TitinAb試劑盒測(cè)定步驟：

　　1.準(zhǔn)備階段：

　　-試劑平衡：將試劑盒從冰箱中取出，室溫平衡20分鐘左右，使試劑的溫度與實(shí)驗(yàn)環(huán)境一致。

　　-樣本準(zhǔn)備：根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，收集并處理樣本，如血清、血漿等，確保樣本質(zhì)量符合實(shí)驗(yàn)要求。

　　-工作液配制：按照說明書的要求，配制洗滌液、酶標(biāo)抗體工作液等所需工作液。注意洗滌液如有結(jié)晶，需水浴加熱使其溶解后再使用。

　　2.加樣與孵育：

　　-加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；樣本孔先加待測(cè)樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍)。然后迅速在各孔中加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體50μL，加蓋或覆膜，輕輕振蕩混勻。

　　-溫育：將包被板放入37℃水浴箱或恒溫箱中，溫育60分鐘。

　　3.洗滌與顯色：

　　-洗滌：棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置1分鐘，甩干，如此重復(fù)洗板5次。

　　-顯色：每孔加入底物溶液90μL，酶標(biāo)板覆膜后置于37℃避光環(huán)境中反應(yīng)25-30分鐘。

　　4.終止與測(cè)定：

　　-終止反應(yīng)：每孔加入終止液50μL，終止反應(yīng)。

　　-測(cè)定吸光度：在確保酶標(biāo)板底無水滴及孔內(nèi)無氣泡后，立即用酶標(biāo)儀在450nm波長處測(cè)量各孔的OD值。

　　5.結(jié)果計(jì)算與判斷：

　　-繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度和對(duì)應(yīng)的OD值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

　　-計(jì)算樣本濃度：將樣本的OD值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，計(jì)算出樣本中TitinAb的濃度。

　　-結(jié)果判斷：根據(jù)計(jì)算出的樣本濃度和說明書中的參考值范圍，判斷樣本是否為陽性或陰性。

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